Chẩn đoán trước sinh các Trisomy 21, 18 và 13 bằng kỹ thuật QF-PCR ở nhóm thai phụ có nguy cơ cao

88
Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 8, số 4 - tháng 8/2018
JOURNAL OF MEDICINE AND PHARMACY
- Địa chỉ liên hệ: Hà Thị Minh Thi, email: haminhthi@gmail.com
- Ngày nhận bài: 7/5/2018; Ngày đồng ý đăng: 12/8/2018, Ngày xuất bản: 20/8/2018
CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH CÁC TRISOMY 21, 18 VÀ 13 BẰNG 
KỸ THUẬT QF-PCR Ở NHÓM THAI PHỤ CÓ NGUY CƠ CAO
Hà Thị Minh Thi, Lê Trung Nghĩa, Nguyễn Viết Nhân, Võ Văn Đức, Lê Thanh Nhã Uyên, 
Lê Phan Tưởng Quỳnh, Đoàn Hữu Nhật Bình, Lê Tuấn Linh
Trường Đại học Y Dược, Đại học Huế
Tóm tắt
Đặt vấn đề: Chẩn đoán trước sinh trisomy 21, 18 và 13 đóng vai trò quan trọng trong nâng cao chất lượng 
dân số. Đề tài này nhằm mục tiêu: (1) Xác định tỷ lệ các trisomy 21,18 và 13 được chẩn đoán bằng kỹ thuật 
QF-PCR từ tế bào ối của các thai có nguy cơ cao; và (2) Khảo sát mối liên quan của các trisomy được chẩn 
đoán với một số đặc điểm của mẹ và thai nhi. Đối tượng và phương pháp: 170 thai phụ có kết quả sàng lọc 
lúc tuổi thai từ 11 tuần đến 13 tuần 6 ngày là nguy cơ cao trisomy 21, 18 và 13. Chẩn đoán trước sinh bằng 
kỹ thuật QF-PCR với DNA chiết tách từ tế bào ối. Kết quả: Tỷ lệ trisomy được chẩn đoán là 9,4%; trong đó, 
trisomy 21 chiếm 68,8%, trisomy 18 chiếm 31,2%, không phát hiện thai trisomy 13. Có mối liên quan giữa các 
trisomy được chẩn đoán với tuổi mẹ (ngưỡng tối ưu 30,5 tuổi) và khoảng sáng sau gáy (ngưỡng tối ưu 1,95 
mm). Giá trị trung vị MoM β-hCG tự do tăng ở nhóm trisomy 21 (4,35, p = 0,021) và giảm ở nhóm trisomy 18 
(0,13, p < 0,001) so với nhóm không trisomy (2,28). Giá trị trung vị MoM PAPP-A huyết thanh giảm ở nhóm 
trisomy 18 (0,14, p = 0,004) so với nhóm không trisomy (0,54). Kết luận: Chẩn đoán trước sinh bằng kỹ thuật 
QF-PCR đã phát hiện tỷ lệ đáng kể các trisomy 21 và 18, có mối liên quan giữa các trisomy được chẩn đoán 
trước sinh với tuổi mẹ, khoảng sáng sau gáy, β-hCG tự do và PAPP-A huyết thanh.
Từ khóa: chẩn đoán trước sinh, trisomy, QF-PCR
Abstract
PRENATAL DIAGNOSIS FOR TRISOMY 21, 18 AND 13 BY 
QUANTITATIVE FLUORESCENT POLYMERASE CHAIN REACTION 
AMONG PREGNANT WOMEN WITH HIGH RISK
Ha Thi Minh Thi, Le Trung Nghia, Nguyen Viet Nhan, Vo Van Duc, Le Thanh Nha Uyen, 
Le Phan Tuong Quynh, Doan Huu Nhat Binh, Le Tuan Linh
Hue University of Medicine and Pharmacy, Hue University
Introduction: Prenatal diagnosis of trisomy 21, 18 and 13 plays a very important role in the improving 
population quality. This study was aimed at (1) Identifying the prevalence of trisomy 21, 18 and 13 by QF-
PCR from amniotic cells of high-risk pregnancies; and (2) Evaluating the association between diagnosed 
trisomies and some characteristics of mother and fetus. Objectives and methods: 170 pregnant women 
with high risk of having trisomy 21, 18 or 13 fetuses during first trimester screening (gestation age from 
11 weeks to 13 weeks 6 days). DNA was extracted from amniocytes for prenatal diagnosis using QF-PCR. 
Results: The prevalence of trisomies was 9.4%, among which trisomy 21 and trisomy 18 accounted for 
68.8% and 31.2%, respectively; none of them was trisomy 13. There was the significant association between 
diagnosed trisomies and maternal age (cut-off 30.5 years old) and nuchal translucency thickness (cut-off 1.95 
mm). MoM median of free β-hCG increased in trisomy 21 group (4.35, p = 0.021) and decreased in trisomy 
18 group (0.13, p < 0.001) as compared to the non-trisomy group (2.28). MoM median of serum PAPP-A 
decreased in trisomy 18 group (0.14, p = 0.004) as compared to the non-trisomy group (0.54). Conclusion: 
Prenatal diagnosis by QF-PCR detected remarkable prevalence of fetuses with trisomy 21 và 18. There was 
the significant association between diagnosed trisomies and maternal age, nuchal translucency thickness, 
free β-hCG and serum PAPP-A.
Keyworks: prenatal diagnosis, trisomy, QF-PCR
89
Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 8, số 4 - tháng 8/2018
JOURNAL OF MEDICINE AND PHARMACY
1. ĐẶT VẤN ĐỀ
Những bất thường số lượng nhiễm sắc thể 
thường có khả năng sống đến khi sinh chủ yếu là 
trisomy 21, trisomy 18 và trisomy 13, chiếm tỷ lệ 
xấp xỉ 90% các bất thường nhiễm sắc thể có biểu 
hiện kiểu hình nặng với nhiều dị tật bẩm sinh [14]. 
Từ những năm 1970, kỹ thuật lập karyotype dựa 
trên nhuộm băng nhiễm sắc thể đã được sử dụng 
thường quy và trở thành tiêu chuẩn vàng trong chẩn 
đoán bất thường nhiễm sắc thể [10]. Tuy nhiên, kỹ 
thuật di truyền tế bào truyền thống này đòi hỏi phải 
nuôi cấy tế bào, đặc biệt trong chẩn đoán trước sinh 
thì việc nuôi cấy tế bào ối tương đối khó khăn và mất 
nhiều thời gian, kết quả thường chỉ có được sau 3-4 
tuần. Trong thực tế, nhiều trường hợp khi thai phụ 
nhận được kết quả chẩn đoán thì tuổi thai đã trên 
20 tuần, làm tăng nguy cơ tai biến cho thai phụ nếu 
phải thực hiện thủ thuật đình chỉ thai kỳ. 
Với sự ra đời và phát triển nhanh chóng của 
các kỹ thuật sinh học phân tử, đặc biệt là các kỹ 
thuật dựa trên nền tảng PCR (Polymerase Chain 
Reaction - based techniques) đã cho phép chẩn 
đoán một số bất thường nhiễm sắc thể bằng cách 
phân tích các trình tự DNA đặc hiệu. Kỹ thuật QF-
PCR (Quantitative Fluorescent Polymerase Chain 
Reaction) sử dụng các cặp mồi đánh dấu huỳnh 
quang để khuếch đại các đa hình STR (short tandem 
repeat: đoạn lặp nối tiếp ngắn), là các trình tự DNA 
đặc hiệu theo nhiễm sắc thể và khác nhau về chiều 
dài giữa các cá thể [13]. Vì vậy, có thể cho phép phát 
hiện bất thường số lượng nhiễm sắc thể thông qua 
các đỉnh tín hiệu huỳnh quang được nhận diện trên 
hệ thống điện di mao quản, với đầu đọc và phần 
mềm chuyên dụng. 
Kỹ thuật QF-PCR có nhiều ưu điểm là chỉ cần rất 
ít lượng tế bào ối, cho kết quả nhanh chóng chỉ sau 
1-2 ngày, giá thành tương đương với kỹ thuật truyền 
thống. Nghiên cứu của Grimshaw đã cho thấy kỹ 
thuật QF-PCR có độ nhạy và độ đặc hiệu rất cao, lần 
lượt là 95,65% và 99,97% [11]. Do đó, QF-PCR đang 
dần dần trở thành kỹ thuật được ưu ti ... cho thấy có 16 trường hợp 
trisomy, chiếm tỷ lệ 9,4%. Kết quả này tương tự 
với nghiên cứu của Rozenberg năm 2006 (13,9%; n 
= 375) [18], Wojdemann năm 2005 (9,6%; n = 125) 
[21], Hoàng Trọng Nam năm 2012 (11,6%; n = 69) 
[3] và một nghiên cứu trước đây của chúng tôi năm 
2013 (9,0%; n = 78) [1], p > 0,05. 
 Một nghiên cứu khác của Đỗ Thị Thanh Thủy 
tiến hành vào năm 2009 ở bệnh viện Từ Dũ – thành 
phố Hồ Chí Minh cho thấy tỷ lệ bất thường số lượng 
nhiễm sắc thể 21, 18, 13 trong số các thai phụ có 
nguy cơ cao mang thai trisomy tham gia chẩn đoán 
trước sinh chỉ có 3,4% (n=324) [5]. Kết quả trong 
nghiên cứu của chúng tôi cao hơn có ý nghĩa thống 
kê với tác giả này (p < 0,05). Sở dĩ trong nghiên cứu 
của Đỗ Thị Thanh Thủy tỷ lệ các bất thường nhiễm 
sắc thể này thấp, chỉ 3,4% vì tác giả đã lựa chọn 
ngưỡng nguy cơ là 1/400 để sàng lọc cả 3 loại bất 
thường: trisomy 21, trisomy 18, trisomy 13 trong khi 
phần lớn chương trình sàng lọc và chẩn đoán trước 
sinh trên thế giới sử dụng ngưỡng nguy cơ trong 
khoảng 1/250-1/300 đối với sàng lọc trisomy 21 và 
trong khoảng 1/150 – 1/200 đối với sàng lọc trisomy 
18, trisomy 13. Nghiên cứu của chúng tôi sử dụng 
các ngưỡng nguy cơ tương tự trên thế giới. Lựa 
chọn ngưỡng nguy cơ cao khi sàng lọc có ý nghĩa rất 
quan trọng trong chẩn đoán trước sinh vì ảnh hưởng 
đến tỷ lệ bà mẹ phải tiến hành chọc ối không cần 
thiết cũng như tỷ lệ bỏ sót trường hợp bất thường.
 Trong số 16 trường hợp thai nhi được chẩn 
đoán bất thường số lượng nhiễm sắc thể 21, 18 
và 13 bằng kỹ thuật QF-PCR của nghiên cứu này, 
có 11 trường hợp trisomy 21 chiếm tỷ lệ cao nhất 
(68,8%), 5 trường hợp trisomy 18 (31,2%) và không 
có trường hợp nào mắc trisomy 13. Nghiên cứu của 
Wojdemann trên 125 trường hợp cũng không phát 
hiện trường hợp trisomy 13 nào [21]. Những nghiên 
cứu khác có phát hiện trisomy 13 tuy nhiên với tỷ lệ 
rất thấp như nghiên cứu của Đỗ Thị Thanh Thủy có 
3 trường hợp [5] và nghiên cứu của Rozenberg có 4 
trường hợp trisomy 13 [18]. Trên thực tế, trisomy 
13 chiếm tỷ lệ rất thấp trong số những trẻ sinh sống, 
chỉ 1/5000 -1/10.000. Các thai trisomy 13 cũng có tỷ 
lệ sẩy cao hơn trisomy 18 và trisomy 21 nên số thai 
trisomy 13 ở tuần thai thứ 16 trở đi cũng thấp hơn 
so với trisomy 18 và đặc biệt là so với trisomy 21. 
Nghiên cứu của chúng tôi phát hiện 16 trường hợp 
trisomy với đa số là trisomy 21 và không có trường 
hợp trisomy 13 nào cũng phù hợp. 
Trong bảng 2 và 3, chúng tôi đã trình bày các 
kiểu tỷ lệ đỉnh tín hiệu thu được khi phân tích đoạn 
(fragment analysis) bằng điện di mao quản của tất 
cả 16 trường hợp trisomy được chẩn đoán trước 
sinh, bao gồm 11 trường hợp trisomy 21 và 5 trường 
hợp trisomy 18. Kết quả cho thấy đa số các trường 
hợp (100% trisomy 21 và 80% trisomy 18) đều có ít 
nhất một marker mang kiểu 3 đỉnh tín hiệu với tỷ 
lệ 1:1:1, như vậy có thể khẳng định các trường hợp 
này đều là trisomy kiểu 3 allele. Kết quả nghiên cứu 
này cũng phù hợp với cơ chế chính gây ra lệch bội là 
do hiện tượng rối loạn không phân ly nhiễm sắc thể 
mà chủ yếu là trong giảm phân I của quá trình tạo 
trứng. Ngoài ra, kết quả các kiểu tỷ lệ đỉnh tín hiệu 
cũng cho thấy tất cả các trường hợp (100%) đã được 
chẩn đoán có đủ thông tin kết luận trisomy trong 
lần phân tích đầu tiên với bộ phản ứng S1 và S2 mà 
không cần phải thực hiện phản ứng bổ sung (M21, 
M18). Điều này chứng tỏ các marker được lựa chọn 
trong bộ kit chẩn đoán trước sinh Aneufast rất đặc 
hiệu, kết quả chẩn đoán trước sinh với bộ kit này đã 
được Grimshaw công bố có độ nhạy và độ đặc hiệu 
rất cao, lần lượt là 95,65% và 99,97% [11].
Trong một phân tích tổng quan của Nicolini, tác 
giả đã trích dẫn một số nghiên cứu trước đây về chẩn 
đoán lệch bội bằng kỹ thuật QF-PCR cho thấy: Verma 
(1998) khi phân tích 2139 trường hợp sử dụng 2-3 
marker để chẩn đoán trisomy 21 thì phát hiện 32/33 
trường hợp; Pertl (1999) khi phân tích 247 trường 
hợp sử dụng 3 marker để chẩn đoán trisomy 18 thì 
phát hiện 4/5 trường hợp. Như vậy, nếu chỉ sử dụng 
2-3 marker thì chưa thể phát hiện được tất cả các 
trường hợp trisomy 21 và 18. Trong các nghiên cứu 
của Mann (2003) và Quaife (2004) khi sử dụng 4 
marker để chẩn đoán lệch bội thì không có trường 
hợp nào chẩn đoán sai [17]. Nghiên cứu của Vũ Thị 
Huyền [2] khi sử dụng cả 5/5 marker và của Nguyễn 
Hoài Nam [4] sử dụng 4/5 marker tương tự nghiên 
cứu của chúng tôi, tỷ lệ có đủ thông tin chẩn đoán 
không cần thực hiện phản ứng bổ sung (back-up) là 
100%.
4.2. Mối liên quan của trisomy ở thai nhi với 
một số chỉ điểm nghiên cứu
Từ các biểu đồ 1 và 2, chúng tôi nhận thấy có sự 
liên quan của các trisomy được chẩn đoán với tuổi 
mẹ (p = 0,032) và khoảng sáng sau gáy (p = 0,002). 
Dựa vào các giá trị của độ nhạy và độ đặc hiệu tương 
ứng với các chỉ số tuổi mẹ và khoảng sáng sau gáy, 
chúng tôi đã xác định được điểm cut-off tối ưu của 
tuổi mẹ là 30,5 tuổi (độ nhạy tương ứng là 93,8%), 
của khoảng sáng sau gáy là 1,95 mm (độ nhạy tương 
ứng là 87,5%). Các kết quả này phù hợp với giá trị 
sàng lọc quý I các thai nhi mắc trisomy của các chỉ số 
94
Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 8, số 4 - tháng 8/2018
JOURNAL OF MEDICINE AND PHARMACY
tuổi mẹ và khoảng sáng sau gáy. Tuy nhiên, diện tích 
dưới đường cong ROC tương ứng của hai yếu tố này 
lần lượt chỉ 0,664 và 0,735, nên khi sử dụng đơn độc 
từng yếu tố sẽ có giá trị không cao. Điều này cũng 
phù hợp với các y văn, việc chỉ sử dụng một yếu tố 
sàng lọc thì tỷ lệ phát hiện thấp và tỷ lệ dương tính 
giả cao, do đó chúng ta cần phối hợp các test sàng 
lọc với nhau để tăng tỷ lệ phát hiện các trường hợp 
thai phụ nguy cơ cao và giảm dương tính giả, hạn 
chế các trường hợp phải chọc ối để làm chẩn đoán 
trước sinh không cần thiết.
Theo Nicolaides, giá trị trung vị MoM β-hCG tự 
do trong máu mẹ ở nhóm thai nhi được chẩn đoán 
trisomy 21 cao hơn nhóm thai nhi có bộ nhiễm sắc 
thể bình thường [15]. Kết quả nghiên cứu của chúng 
tôi cũng phù hợp với kết luận trên: trung vị MoM 
của β-hCG tự do ở nhóm trisomy 21 là 4,35 cao 
hơn giá trị trung vị MoM của β-hCG tự do ở nhóm 
bình thường 2,35, với p < 0,05. So sánh với kết quả 
nghiên cứu của một số tác giả khác, kết quả chúng 
tôi có phần cao hơn: Kagan [12] giá trị trung vị này là 
2, Spencer [19] là 2,15, Canick [8] giá trị này là 1,8 ở 
nhóm mang thai trisomy 21. 
 Ngược lại, trong các thai nhi được chẩn đoán 
trisomy 18, giá trị trung vị MoM β-hCG tự do trong 
máu mẹ giảm [15]. Trong nghiên cứu của chúng 
tôi, giá trị trung vị MoM β-hCG tự do trong nhóm 
trisomy 18 là 0,13, thấp hơn có ý nghĩa thống kê so 
với giá trị trung vị MoM ở nhóm bình thường. Kết 
quả này phù hợp với kết quả của Karl O. Kagan và 
cs [12], Natasha Tul và cs [20], Roberto Biagiotti và 
cs [6]: nồng độ β-hCG tự do của bà mẹ mang thai 
trisomy 18 đều giảm, lần lượt là 0,281; 0,2 và 0,34.
Trong nghiên cứu của chúng tôi, trung vị MoM 
của PAPP-A huyết thanh ở nhóm bà mẹ mang thai 
trisomy 21 và trisomy 18 lần lượt là 0,35 và 0,14, tuy 
nhiên khi so sánh với trung vị MoM của nhóm bình 
thường (0,54) thì sự khác biệt chỉ có ý nghĩa thống 
kê ở nhóm trisomy 18. Kết quả của chúng tôi cũng 
phù hợp với một số tác giả khác như nghiên cứu của 
Brambati (1994) có trung vị MoM PAPP-A ở nhóm 
bà mẹ mang thai trisomy 21 là 0,31 [7], nghiên cứu 
của Christiansen có giá trị này là 0,30 [9], và nghiên 
cứu của Canick là 0,40 [8]. Tác giả Nicolaides [16] ghi 
nhận giá trị MoM của PAPP-A ở các thai kỳ trisomy 
21 vào thời điểm thai 12 tuần là thấp hơn 0,5. Ở 
nhóm bà mẹ mang thai trisomy 18, kết quả trung 
vị MoM của PAPP-A trong nghiên cứu của chúng tôi 
cũng tương tự với các nghiên cứu khác: nghiên cứu 
của Karl O. Kagan [12] giá trị này là 0,2; của Natasha 
Tul [20] là 0,177. 
5. KẾT LUẬN
Qua nghiên cứu 170 bà mẹ mang thai nguy cơ 
cao được thực hiện xét nghiệm QF-PCR để chẩn 
đoán trước sinh các trisomy 21, 18 và 13 tại Trung 
tâm sàng lọc – chẩn đoán trước sinh và sơ sinh bệnh 
viện Trường Đại học Y Dược Huế, chúng tôi rút ra các 
kết luận sau:
5.1. Tỷ lệ các trisomy được chẩn đoán trước 
sinh bằng kỹ thuật QF-PCR
- Tỷ lệ bà mẹ mang thai nguy cơ cao được chẩn 
đoán trước sinh thai mắc trisomy 21, 18 và 13 bằng 
kỹ thuật QF-PCR là 9,4%; trong đó, thai trisomy 21 
chiếm tỷ lệ 68,8%, trisomy 18 chiếm 31,2%, không 
phát hiện trường hợp thai trisomy 13. 
- 100% trisomy 21 và 80% trisomy 18 thuộc 
nhóm trisomy kiểu 3 allele.
5.2. Mối liên quan của các trisomy với đặc điểm 
của mẹ và thai
- Có mối liên quan giữa các trisomy được chẩn 
đoán với tuổi mẹ (ngưỡng tối ưu 30,5 tuổi) và 
khoảng sáng sau gáy (ngưỡng tối ưu 1,95 mm). 
- Giá trị trung vị MoM của β-hCG tự do huyết 
thanh tăng ở nhóm bà mẹ mang thai trisomy 21 
(4,35) và giảm ở nhóm bà mẹ mang thai trisomy 18 
(0,13) so với nhóm không mắc trisomy (2,28). Giá trị 
trung vị MoM của PAPP-A huyết thanh giảm ở nhóm 
bà mẹ mang thai trisomy 18 (0,14) so với nhóm 
không trisomy (0,54). 
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Đoàn Hữu Nhật Bình, Lê Tuấn Linh, Nguyễn Viết 
Nhân, Hà Thị Minh Thi, Đoàn Thị Duyên Anh, Lê Phan 
Tưởng Quỳnh (2013), “Nghiên cứu sàng lọc và chẩn đoán 
các bất thường số lượng Nhiễm sắc thể 21, 18, 13 của thai 
nhi tại miền Trung Việt Nam”, Tạp chí Y dược Học trường 
đại học Y dược Huế, 3 (13), tr.14-19.
2. Vũ Thị Huyền (2012), Áp dụng kỹ thuật QF-PCR để 
chẩn đoán trước sinh hội chứng Down, Luận văn Bác sỹ 
nội trú, Trường Đại học Y Hà Nội.
3. Hoàng Trọng Nam (2012), Đánh giá kết quả sàng lọc 
trước sinh tuổi thai từ 11 tuần - 13 tuần 6 ngày dựa trên 
độ mờ da gáy, beta hCG tự do và PAPP-A, Luận văn Thạc 
sỹ Y học, Trường Đại học Y dược Huế.
4. Nguyễn Hoài Nam (2011), Nghiên cứu ứng dụng 
kỹ thuật QF-PCR trong chẩn đoán trước sinh một số hội 
chứng lệch bội Nhiễm sắc thể, Luận văn Thạc sỹ y học, 
95
Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 8, số 4 - tháng 8/2018
JOURNAL OF MEDICINE AND PHARMACY
Trường Đại học Y Hà Nội.
5. Đỗ Thị Thanh Thủy, Bùi Thị Hồng Nga, Hà Tố Nguyên 
(2009), “Nghiên cứu ứng dụng test phối hợp (combined 
test) trong tầm soát trước sinh ba tháng đầu thai kỳ”, Tạp 
chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, 13 (1), tr.190 - 197.
6. Biagiotti, R., Cariati, E., Brizzi, L., Cappelli, G., 
D’Agata, A. (1998), “Maternal serum screening for trisomy 
18 in the first trimester of pregnancy”, Prenatal diagnosis, 
18 (9), pp.907-913.
7. Brambati, B., Tului, L., Bonacchi, I., Shrimanker, 
K., Suzuki, Y., Grudzinskas, J. (1994), “Serum PAPP-A and 
free β-hCG are first-trimester screening markers for down 
syndrome”, Prenatal diagnosis, 14 (11), pp.1043-1047.
8. Canick, J.A.,Kellner, L.H. (1999), “First trimester 
screening for aneuploidy: serum biochemical markers,” in 
Seminars in perinatology, pp. 359-368.
9. Christiansen, M.,Jaliashvili, I. (2003), “Total 
pregnancy-associated plasma protein A—a first trimester 
maternal serum marker for Down’s syndrome: clinical 
and technical assessment of a poly-monoclonal enzyme 
immunoassay”, Scandinavian journal of clinical and 
laboratory investigation, 63 (6), pp.407-416.
10. Faas, B.H.,Cirigliano, V. (2011), “Rapid methods 
for targeted prenatal diagnosis of common chromosome 
aneuploidies,” in Seminars in Fetal and Neonatal Medicine, 
pp. 81-87.
11. Grimshaw, G., Szczepura, A., Hulten, M., 
MacDonald, F., Nevin, N., Sutton, F., et al. (2003), 
“Evaluation of molecular tests for prenatal diagnosis of 
chromosome abnormalities”, Health technol assess, 7 
(10), pp.1-146.
12. Kagan, K.O., Wright, D., Valencia, C., Maiz, N., 
Nicolaides, K.H. (2008), “Screening for trisomies 21, 18 
and 13 by maternal age, fetal nuchal translucency, fetal 
heart rate, free β-hCG and pregnancy-associated plasma 
protein-A”, Human reproduction, 23 (9), pp.1968-1975.
13. Mansfield, E.S. (1993), “Diagnosis of Down 
syndrome and other aneuploidies using quantitative 
polymerase chain reaction and small tandem repeat 
polymorphisms”, Human Molecular Genetics, 2 (1), pp.43-
50.
14. Moftah, R., Marzouk, S., El-Kaffash, D., Varon, R., 
Bommer, C., Karbasiyan, M., et al. (2013), “QF-PCR as a 
molecular-based method for autosomal aneuploidies 
detection”, Advances in Reproductive Sciences, 1 (03), 
pp.21.
15. Nicolaides, K.H. (2011), “Screening for fetal 
aneuploidies at 11 to 13 weeks”, Prenatal diagnosis, 31 
(1), pp.7-15.
16. Nicolaides, K.H. (2004), The 11-13+6 weeks scan, 
London.
17. Nicolini, U., Lalatta, F., Natacci, F., Curcio, C., Bui, 
T.-H. (2004), “The introduction of QF-PCR in prenatal 
diagnosis of fetal aneuploidies: time for reconsideration”, 
Human reproduction update, 10 (6), pp.541-548.
18. Rozenberg, P., Bussières, L., Chevret, S., Bernard, 
J.P., Malagrida, L., Cuckle, H., et al. (2006), “Screening for 
Down syndrome using first-trimester combined screening 
followed by second-trimester ultrasound examination in 
an unselected population”, American Journal of Obstetrics 
& Gynecology, 195 (5), pp.1379-1387.
19. Spencer, K., Souter, V., Tul, N., Snijders, R., 
Nicolaides, K. (1999), “A screening program for trisomy 
21 at 10–14 weeks using fetal nuchal translucency, 
maternal serum free β-human chorionic gonadotropin 
and pregnancy-associated plasma protein-A”, Ultrasound 
in obstetrics & gynecology, 13 (4), pp.231-237.
20. Tul, N., Spencer, K., Noble, P., Chan, C., 
Nicolaides, K. (1999), “Screening for trisomy 18 by fetal 
nuchal translucency and maternal serum free β-hCG and 
PAPP-A at 10–14 weeks of gestation”, Prenatal diagnosis, 
19 (11), pp.1035-1042.
21. Wojdemann, K., Shalmi, A., Christiansen, M., 
Larsen, S., Sundberg, K., Brocks, V., et al. (2005), “Improved 
first-trimester Down syndrome screening performance 
by lowering the false-positive rate: a prospective study 
of 9941 low-risk women”, Ultrasound in obstetrics & 
gynecology, 25 (3), pp.227-233.